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[size=3][font=楷体_GB2312][讨论贴]单细胞凝胶电泳技术及应用讨论
做了一年的单细胞凝胶电泳工作,也查阅了不少相关资料,随着经验的积累,总结了一些经验和教训,想和大家讨论,希望大家积极参与
2011年12月08日发布人:一叶
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1. G418筛选要做预试验确定最佳浓度,将细胞稀释至1000cell/ml,每孔100ul加入有培养基的24孔板,将每孔中的G418浓度稀释至0,,100
2011年12月17日发布人:junjie05
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稳定株筛选做实验,要设计哪些对照。
[url]http://cell.dxy.cn/bbs/topic/18544525?tpg=1&age=0[/url
2012年03月15日发布人:hot_hot_hot
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各位师兄师姐好,我构建了真核表达载体用脂质体转染宫颈癌细胞后,是瞬时转染的,需要用G418筛选稳定细胞株,有了抗性克隆后如何让它大量扩增呢?我筛的细胞有了克隆后死活不长了真急死人了
2012年06月28日发布人:xingyi08
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各位细胞高手,新年好!
救救我吧:
我的细胞经转染后,G418筛选了12天,阴性对照组全部死亡,转染组出现了几个阳性克隆,再用G418维持筛选,至今已16天,现在每瓶
2012年08月11日发布人:guagua
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:筛选基因和目的基因共表达的质粒
转染试剂:Lipofectamine2000
操作:转染→混合板培养及检测→单克隆培养及检测
转染:主要按照Lipofectamine2000说明书进行。见其Plasmid DNA
2012年05月10日发布人:fqswdzd
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不知你的细胞是否耐受基地密度培养、
10倍稀释是可以的,还可以在稀释一下;等到一定的汇合率的时候,加入筛选培养基来筛选,一段时间后,形成克隆,可以把克隆取出,在扩大培养
2012年05月15日发布人:xyw5
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和大家再分享讨论一项技术,In-cell Wstern。
说白一点,In-cell western就是利用不同的抗体,直接将细胞在96孔板上进行蛋白表达的检测,但是检测
2013年11月27日发布人:kuaizige
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专业是制剂,还因为制剂的人员确实很需要我们讨论相关的问题,还有我还有不少年的制药实践。在那里,我还是受到比较好的欢迎。我感谢制剂版那些曾经给我支持和鼓励的人。
楼主从事医药工作共18年,比较擅长生物制药,对化学制药,天然药物也有一定的经历和浓厚的兴趣,对下游膜分离技术及纯化技术
2013年04月26日发布人:fsdd817
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[size=2][color=Black][b]我用293细胞做转染,转染已经成功了,测过活性还可以,现在在用有限稀释法挑单克隆,但按书上的方法挑了三次都没有成功,就是将细胞稀释到10000个/ml,然后再稀释10倍,再稀释10倍,直到
2023年02月13日发布人:tianmei001